Phân tích Advantame trong thực phẩm bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao

Phân tích Advantame trong Phụ gia Thực phẩm

Thí nghiệm này được thực hiện theo tiêu chuẩn "GB 1886.377-2024 Tiêu chuẩn An toàn Thực phẩm Quốc gia - Phụ gia Thực phẩm Advantame", bằng cách sử dụng hệ thống Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) Wayeal LC3200 Series được trang bị đầu dò UV để phân tích. Kết quả thí nghiệm cho thấy hệ thống có độ phù hợp tuyệt vời, với hình dạng đỉnh tốt cho cả axit benzoic và advantame. Không có đỉnh nào khác xung quanh các đỉnh mục tiêu và số đĩa lý thuyết cao đã xác nhận sự tuân thủ tất cả các yêu cầu thử nghiệm. Hệ số tương quan tuyến tính vượt quá 0,999. Thí nghiệm cho thấy độ lặp lại tuyệt vời, với độ lệch chuẩn tương đối (RSD) của thời gian lưu là 0,027% đối với axit benzoic và 0,049% đối với advantame, và RSD diện tích đỉnh lần lượt là 0,184% và 0,133%. Giới hạn phát hiện lý thuyết là 0,066mg/L đối với axit benzoic và 0,113mg/L đối với advantame. Không phát hiện thấy chất phân tích mục tiêu trong thử nghiệm mẫu. Tất cả dữ liệu phân tích đều đáp ứng các yêu cầu về hiệu suất dụng cụ được quy định trong phương pháp dược điển.

Từ khóa: Advantame, sắc ký lỏng hiệu năng cao, đầu dò UV.

1. Phương pháp Thí nghiệm

1.1 Cấu hình Dụng cụ

Bảng 1 Danh sách Cấu hình của Hệ thống HPLC

1.2 Vật liệu Thí nghiệm và Thiết bị Phụ trợ

Acetonitril: Cấp sắc ký

Chuẩn axit benzoic

Chuẩn Advantame

1.3 Điều kiện Thử nghiệm

Bảng 2 Điều kiện Phân tích HPLC

1.4 Chuẩn bị Dung dịch

1.4.1 Dung dịch Chuẩn Nội

Cân chính xác 40mg axit benzoic, hòa tan trong dung môi hỗn hợp nước-acetonitril và pha loãng chính xác đến 50mL.

1.4.2 Dung dịch Chuẩn

Cân chính xác 40mg advantame, hòa tan trong dung môi hỗn hợp nước-acetonitril và pha loãng chính xác đến 50mL để chuẩn bị dung dịch gốc chuẩn 0,8mg/mL. Hút chính xác 8mL, 9mL, 10mL, 11mL và 12mL dung dịch gốc chuẩn vào năm bình định mức riêng biệt. Thêm 5mL dung dịch chuẩn nội vào mỗi bình, sau đó pha loãng đến 50mL bằng dung môi hỗn hợp nước-acetonitril để chuẩn bị các dung dịch làm việc chuẩn với nồng độ 0,128mg/mL, 0,144mg/mL, 0,160mg/mL, 0,176mg/mL và 0,192mg/mL để xây dựng đường chuẩn.

1.4.3 Chuẩn bị Mẫu

Cân chính xác 40mg mẫu thử, hòa tan trong dung môi hỗn hợp nước-acetonitril và pha loãng chính xác đến 50mL. Hút 10mL dung dịch đã chuẩn bị vào bình định mức, thêm 5mL dung dịch chuẩn nội và pha loãng đến 50mL bằng dung môi hỗn hợp nước-acetonitril. Lọc dung dịch qua màng lọc để thử nghiệm.

2. Kết quả và Thảo luận

2.1 Độ phù hợp của Hệ thống

Hình 1 Sắc ký đồ Thử nghiệm Độ phù hợp của Hệ thống

Bảng 3 Dữ liệu Thử nghiệm Độ phù hợp của Hệ thống

Lưu ý: Như bảng trên cho thấy, thử nghiệm độ phù hợp của hệ thống cho thấy hình dạng đỉnh tuyệt vời cho cả axit benzoic và advantame, với hệ số đuôi dưới 1.2. Độ phân giải vượt quá 1.5 và số đĩa lý thuyết cao đáp ứng đầy đủ các yêu cầu của phương pháp phân tích.

2.2 Thử nghiệm Đường chuẩn

Hình 2 Báo cáo Thử nghiệm Đường chuẩn Advantame

Lưu ý: Kết quả thí nghiệm cho thấy độ tuyến tính tuyệt vời để định lượng advantame, với hệ số tương quan (R²) vượt quá 0,999, đáp ứng các yêu cầu thí nghiệm.

2.3 Thử nghiệm Độ lặp lại

Hình 3 Sắc ký đồ Thử nghiệm Độ lặp lại Sáu lần tiêm

Bảng 4 Dữ liệu Thử nghiệm Độ lặp lại Axit Benzoic (6 lần tiêm)

Bảng 5 Dữ liệu Thử nghiệm Độ lặp lại Advantame (6 lần tiêm)

Lưu ý: Từ dữ liệu trong bảng trên, độ lặp lại thời gian lưu của axit benzoic và advantame là 0,027% và 0,049%, và độ lặp lại diện tích đỉnh lần lượt là 0,184% và 0,133%, cho thấy độ lặp lại tốt.

2.4 Thử nghiệm Giới hạn Phát hiện

Hình 4 Sắc ký đồ của Dung dịch Chuẩn Axit Benzoic 0,8mg/L và Advantame 1,28mg/L

Bảng 6 Kết quả Thử nghiệm cho Dung dịch Chuẩn Axit Benzoic 0,8mg/L và Advantame 1,28mg/L

Lưu ý: Theo dữ liệu thử nghiệm mẫu chuẩn trong bảng trên, với nồng độ axit benzoic là 0,8mg/L và nồng độ advantame là 1,28mg/L, giới hạn phát hiện lý thuyết đối với axit benzoic và advantame, được tính dựa trên tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu gấp 3 lần, lần lượt là 0,066mg/L và 0,113mg/L.

2.5 Thử nghiệm Đồ uống Thương hiệu A

Hình 5 Sắc ký đồ của Đồ uống Thương hiệu A

Lưu ý: Không phát hiện thấy advantame trong đồ uống mang nhãn hiệu được thử nghiệm.

3. Kết luận

Thí nghiệm này được thực hiện theo "GB 1886.377-2024 Tiêu chuẩn An toàn Thực phẩm Quốc gia - Phụ gia Thực phẩm Advantame" bằng cách sử dụng hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao Wayeal LC3200, được trang bị đầu dò UV để phân tích. Kết quả thí nghiệm cho thấy hệ thống có độ phù hợp tuyệt vời, với hình dạng đỉnh tốt cho cả axit benzoic và advantame. Không có đỉnh nào khác xung quanh các đỉnh mục tiêu và số đĩa lý thuyết cao đã xác nhận sự tuân thủ tất cả các yêu cầu thử nghiệm. Hệ số tương quan tuyến tính vượt quá 0,999. Thí nghiệm cho thấy độ lặp lại tuyệt vời, với độ lệch chuẩn tương đối (RSD) của thời gian lưu là 0,027% đối với axit benzoic và 0,049% đối với advantame, và RSD diện tích đỉnh lần lượt là 0,184% và 0,133%. Giới hạn phát hiện lý thuyết là 0,066mg/L đối với axit benzoic và 0,113mg/L đối với advantame. Không phát hiện thấy chất phân tích mục tiêu trong thử nghiệm mẫu. Tất cả dữ liệu phân tích đều đáp ứng các yêu cầu về hiệu suất dụng cụ được quy định trong phương pháp dược điển.