2025-08-26
Desloratadine, còn được gọi là AERIUS (Schering-Plough) / DENOSIN (Metha), là một chất đối kháng histamine tricyclic tác dụng lâu thế hệ thứ ba.Nó thường được sử dụng để làm giảm các triệu chứng toàn thân và địa phương liên quan đến bệnh trĩ idiopathic mãn tính và viêm mũi dị ứng thường niênDo sự hiện diện của một amine thứ cấp trong cấu trúc của nó, desloratadine có thể tạo ra các tạp chất NDSRI tương ứng.Người ta suy đoán rằng cấu trúc của tạp chất nitrosamine của nó được hiển thị trong Hình 1 bên dướiTheo hướng dẫn của FDA về kiểm soát tạp chất nitrosamine trong thuốc, giá trị tiêu thụ chấp nhận được (AI) cho N-Nitroso-Desloratadine là 400ng / ngày.
Hình 1 Biểu đồ cấu trúc của Desloratadine và N-Nitroso-Desloratadine
Giá trị AI cho các tạp chất nitrosamine là 400ng / ngày. Dựa trên liều hàng ngày tối đa 5mg / ngày được chỉ định trong hướng dẫn được phê duyệt cho dung dịch đường uống desloratadine, giới hạn kiểm soát là 80ppm. Theo giới hạn kiểm soát được thiết lập,một phương pháp sắc tố lỏng hiệu suất cao (HPLC) đã được phát triển để xác định các tạp chất nitrosamine trong các thành phần dược phẩm hoạt động của desloratadine (API). Việc xác nhận phương pháp được thực hiện bằng cách sử dụng hệ thống HPLC dòng Wayeal's LC3400 được trang bị một máy dò tia cực tím (UV).giới hạn phát hiệnCác kết quả cho thấy rằng phương pháp này là cụ thể và nhạy cảm.
Từ khóa:Desloratadine, Chromatography lỏng hiệu suất cao, tạp chất NDSRI
1Các dụng cụ và chất phản ứng
1.1 Danh sách cấu hình của Máy Chromatograph Lỏng hiệu suất cao
|
Không, không. |
Mô-đun |
Qty |
|
1 |
Máy phát hiện tia UV3400 |
1 |
|
2 |
P3400B Máy bơm áp suất cao kép |
1 |
|
3 |
CT3400 Cửa lò cột |
1 |
|
4 |
AS3400 Máy lấy mẫu tự động |
1 |
|
5 |
SmartLab NetCDS Workstation |
1 |
|
6 |
C18 250*4,6mm, 5μm |
1 |
1.2 Danh sách các chất phản ứng và dung dịch tiêu chuẩn
Bảng 2 Bảng các chất phản ứng và dung dịch tiêu chuẩn
|
Không, không. |
Các chất phản ứng và tiêu chuẩn |
Độ tinh khiết |
|
1 |
Acetonitrile |
HPLC cấp |
|
2 |
axit trifluoroacetic |
AR |
|
3 |
Natri dodecyl sulfat |
AR |
|
4 |
N-Nitroso-Desloratadine |
980,9% |
1.3 Vật liệu thí nghiệm và thiết bị phụ trợ
Máy làm sạch siêu âm
Máy trộn xoáy
2Phương pháp thí nghiệm
2.1 Chuẩn bị dung dịch
2.1.1 Natri Dodecyl Sulfate (SDS) dung dịch nước:Đánh nặng 0,865 g natri dodecyl sulfate và thêm 0,5 ml axit trifluoroacetic. Loãng đến 1000 ml với nước và trộn kỹ cho đến khi hòa tan hoàn toàn.
2.1.2 dung môi:Tương tự như giai đoạn di động (Chẩn đoán chính xác 570mL dung dịch nước natri dodecyl sulfate và 430mL acetonitrile, trộn tốt và sẵn sàng sử dụng).
2.1.3 Giải pháp tuyến tính:Đánh nặng chính xác một lượng thích hợp của tiêu chuẩn tham chiếu N-Nitroso-Desloratadine, và hòa tan và pha loãng với pha di động để có được dung dịch chứa khoảng 0.8μSau đó, chính xác pipette 1.0mL, 1.5mL, 2.0mL, 4.0mL, và 10.0mL của dung dịch gốc tiêu chuẩn vào năm chai 100mL riêng biệt.Loại hóa thành khối lượng với pha di động và trộn tốt để chuẩn bị đường cong làm việc loạt tiêu chuẩn với nồng độ 8ng/mL, 12ng/mL, 16ng/mL, 32ng/mL và 80ng/mL.
2.1.4 Giải pháp tiêu chuẩn tham chiếu:Đánh nặng chính xác một lượng thích hợp của tiêu chuẩn tham chiếu N-Nitroso-Desloratadine,hòa tan và pha loãng để chuẩn bị dung dịch có chứa khoảng 16ng/ml N-Nitroso-Desloratadine, là giải pháp tiêu chuẩn tham chiếu.
2.2 Chuẩn bị mẫu
2.2.1 dung dịch mẫu
Chính xác pipette một lượng thích hợp của API desloratadine, hòa tan và pha loãng để chuẩn bị dung dịch chứa khoảng 0,2 mg/ml desloratadine, như dung dịch mẫu.
2.2.2 Giải pháp chính xác
Đánh nặng khoảng 20 mg API desloratadine vào một bình 100mL. Thêm một khối lượng thích hợp của dung dịch tiêu chuẩn tham khảo N-Nitroso-Desloratadine,hòa tan và pha loãng đến khối lượng với pha di động để chuẩn bị một mẫu 100%Trộn kỹ để có được dung dịch chính xác.
3Kết quả thí nghiệm.
3.1 Đặc tính
Hình 2 Chromatogram thử nghiệm đặc tính
Lưu ý: dung môi không ảnh hưởng đến việc phát hiện N-Nitroso-Desloratadine,và các đỉnh tạp chất khác trong dung dịch thử cũng không ảnh hưởng đến việc xác định tạp chất N-Nitroso-Desloratadine.
3.2 Thử nghiệm tuyến tính
Hình 3 Chromatogram chồng chéo cho thử nghiệm tạp chất N-Nitroso-Desloratadine
Hình 4 Đường cong tiêu chuẩn cho các tạp chất N-Nitroso-Desloratadine
Lưu ý: Kết quả thí nghiệm cho thấy hệ số tương quan tuyến tính (R) cho thử nghiệm tạp chất N-Nitroso-Desloratadine vượt quá 0.999, đáp ứng các yêu cầu thử nghiệm.
3.3 Xét nghiệm lặp lại
Hình 5 Chromatograms lặp lại 16 ng/mL tiêu chuẩn (6 tiêm)
Bảng 3 Dữ liệu thử nghiệm lặp lại cho tiêu chuẩn 16 ng/mL (6 tiêm)
|
Chất hợp chất |
Thời gian lưu giữ (phút) |
|
N-Nitroso-Desloratadine |
15.426 |
|
15.432 |
|
|
15.414 |
|
|
15.416 |
|
|
15.432 |
|
|
15.417 |
|
|
Trung bình |
15.421 |
|
RSD (%) |
0.045 |
Lưu ý: Dựa trên dữ liệu từ bảng trên, khả năng lặp lại thời gian giữ lại cho N-Nitroso-Desloratadine là 0, 045%, và khả năng lặp lại vùng đỉnh là 2, 043%, cho thấy khả năng lặp lại tốt.
3.4 Kiểm tra độ chính xác
Hình 6 Chromatogram trùng lặp chính xác cho Desloratadine API
Bảng 4 Độ chính xác của API Desloratadine (N-Nitroso-Desloratadine)
|
Mức độ |
Giá trị được biết (ng) |
Chất đúc (ng) |
Giá trị đo (ng) |
Thu hồi (%) |
Trung bình (%) |
|
100% |
0.00 |
1611.52 |
1656.365 |
99.690 |
100.11 |
|
100% |
0.00 |
1610.546 |
96.932 |
||
|
100% |
0.00 |
1686.721 |
101.517 |
||
|
100% |
0.00 |
1704.476 |
102.585 |
||
|
100% |
0.00 |
1615.701 |
97.242 |
||
|
100% |
0.00 |
1706.194 |
102.689 |
Lưu ý: Tỷ lệ phục hồi của N-nitroso-desloratadine trong sáu mẫu dao động từ 97,24% đến 102,69%, với RSD là 2,58%.Những kết quả này cho thấy rằng phương pháp đạt được độ chính xác tuyệt vời và khả năng lặp lại để phát hiện tạp chất này.
3.5 Thử nghiệm giới hạn phát hiện (LOD)
Hình 7 Chromatogram của Tiêu chuẩn tham chiếu N-Nitroso-Desloratadine ở 8ng/mL
Bảng 5 Dữ liệu thử nghiệm cho tiêu chuẩn tham chiếu N-Nitroso-Desloratadine ở 8ng/mL
|
Chất hợp chất |
Thời gian lưu giữ (phút) |
Khu vực đỉnh (mAU) |
SNR |
|
N-Nitroso-Desloratadine |
15.434 |
1.213 |
30.042 |
Lưu ý: Dựa trên dữ liệu thử nghiệm cho tiêu chuẩn tham chiếu N-Nitroso-Desloratadine ở 8ng/mL trong bảng trên,giới hạn phát hiện lý thuyết (LOD) được tính bằng cách sử dụng tỷ lệ tín hiệu - tiếng ồn 3 lần là 0.7989ng/mL.
3.6 Kiểm tra nguyên liệu thô cho một nhà sản xuất cụ thể
Hình 8 Chromatogram của thử nghiệm API cho một nhà sản xuất cụ thể
Lưu ý: Không phát hiện N-Nitroso-Desloratadine trong API.
4Kết luận
A study on the nitrosamine impurity N-Nitroso-Desloratadine in Desloratadine Active Pharmaceutical Ingredient (API) was conducted based on the recently issued FDA guidance document regarding the establishment of acceptable intake limits for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRIs)Theo tài liệu, giá trị tiêu thụ chấp nhận được (AI) được thiết lập là 400ng / ngày. Kết hợp với liều hàng ngày tối đa của sản phẩm (5mg), giới hạn kiểm soát trong API không được vượt quá 80ppm.Việc xác nhận phương pháp đã được thực hiện bằng cách sử dụng hệ thống Chromatography chất lỏng hiệu suất cao (HPLC) LC3400 của Wayeal.Phương pháp phân tích đã được xác nhận đã được áp dụng để kiểm tra các mẫu thành phần dược phẩm hoạt động,và không phát hiện được tạp chất nitrosamine (N-nitroso-desloratadine)Tất cả các dữ liệu trên đáp ứng các yêu cầu của phương pháp dược phẩm cho các dụng cụ.
Gửi yêu cầu của bạn trực tiếp đến chúng tôi
