Xác định thành phần đường trong cây có dầu bằng sắc ký ion

Nghiên cứu này sử dụng nhiễm sắc thể ion để xác định hàm lượng fructose, glucose, sucrose, stachyose và raffinose trong cây trồng dầu.Tác giả sử dụng một Wayeal ion chromatograph được trang bị một máy dò amperometric, sử dụng dung dịch NaOH và nước tự chuẩn bị làm chất xả.,hàm lượng glucose, sucrose, stachyose và raffinose trong hạt dầu như được chỉ định trong tiêu chuẩn.

Từ khóa: hạt dầu, sắc tố ion, đường.

1Các dụng cụ và chất phản ứng

1.1 Danh sách cấu hình của Ion Chromatography

Bảng 1 Danh sách cấu hình thiết bị

1.2 Chất phản ứng và dung dịch tiêu chuẩn

Bảng 2 Bảng các chất phản ứng và tiêu chuẩn

1.3 Vật liệu thí nghiệm và thiết bị phụ trợ

Thiết lập lọc

Máy làm sạch siêu âm

Cân cân phân tích (chính xác 0,0001g)

Bơm dùng một lần (2ml)

Bộ lọc ống tiêm nước (0,22μm)

Nước siêu tinh khiết, có điện trở 18,2 MΩ·cm (25°C)

2Phương pháp thí nghiệm

2.1 Chuẩn bị dung dịch

2.1.1 Giải pháp axetat kẽm (1mol/L): Đánh nặng 21,9g axetat kẽm, thêm 3mL axit acetic băng giá, hòa tan và pha loãng đến 100mL với nước.

2.1.2 dung dịch potassium ferrocyanide (1 mol/L): Đánh nặng 10,6g potassium ferrocyanide, hòa tan và pha loãng đến 100mL với nước.

2.1.3 dung dịch natri hydroxit (200mmol/L): Đo 10,5mL dung dịch natri hydroxit 50%, pha loãng đến 1000mL với nước đã khử khí và bảo vệ bằng khí nitơ.

2.2 Xử lý trước mẫu

2.2.1 Lấy mẫu

Đánh nặng 5g mẫu (chính xác đến 0,1mg), đặt nó trong một ống ly tâm 50mL với nút, thêm 25mL petroleum ether, xoáy trong 1 phút, ly tâm ở 2000r/min trong 5 phút,và loại bỏ lớp trên của ether dầu mỏ. Lặp lại hai lần các bước trên. Bốc hơi ether dầu thô còn lại trong bồn tắm nước 60 °C. Chuyển mẫu vào một bình hình nón 150 ml (trước đó được đưa đến trọng lượng không đổi) bằng một thanh thủy tinh.Rửa ống ly tâm hai lần với 50 ml nướcTừ từ thêm 5 ml dung dịch axetat kẽm và 5 ml dung dịch kali ferrocyanide.Thêm nước cho đến khi tổng khối lượng của dung dịch khoảng 100g (chính xác đến 1mg)Sau khi xáo trộn ở nhiệt độ phòng trong 30 phút, lọc dung dịch qua giấy lọc nhanh chất lượng.Đồng thời, thực hiện một thử nghiệm trắng.

2.3 Điều kiện thử nghiệm

2.3.1 Điều kiện Chromatography

Giai đoạn di động: A: 200mM NaOH; B: nước; C: 20mM NaOH

Tốc độ dòng chảy: 0,4 ml/min

Thời gian hoạt động: 65 phút

Nhiệt độ cột: 30°C

Nhiệt độ vùng phát hiện: 30°C

Máy phát hiện: điện cực vàng, đường, tiềm năng gấp 4 lần

Khối lượng tiêm: 10μL

Bảng 3 Phân hóa gradient

3Kết quả thí nghiệm.

3.1 Chromatogram tiêu chuẩn

Việc tách 5 loại đường đã hoàn thành trong vòng 20 phút, với tất cả các đỉnh biểu hiện hình dạng tốt, không có hiện tượng đuôi, và tất cả các hợp chất cho thấy phản ứng tuyệt vời,đáp ứng các yêu cầu về xác định thử nghiệm.

Hình 1 Chromatogram 5 đường (0,5mg/L)

Bảng 4 Kết quả phù hợp với hệ thống

3.2 Phạm vi tuyến tính

Lấy một lượng thích hợp của dung dịch tiêu chuẩn trộn, và thực hiện pha loãng hàng loạt để chuẩn bị một loạt nồng độ để xây dựng đường cong tiêu chuẩn.Phạm lệ giữa kết quả phát hiện tuyến tính và nồng độ được biết là nhỏ hơn so với độ lệch tối đa cho phépCác giá trị R2 dao động từ 0,99985 đến 1.00000, cho thấy tính tuyến tính tuyệt vời cho tất cả các thành phần.

Bảng 5 Bảng phạm vi tuyến tính cho mỗi hợp chất

Hình 2 Kết quả tuyến tính cho năm loại đường

3.3 Độ chính xác

Giải pháp mẫu đậu nành được chiết xuất theo mục 2.2.1 và được phân tích trong điều kiện theo thiết bị được chỉ định trong phần 2.3.1 với sáu lần tiêm liên tiếp. Kết quả được hiển thị trong bảng dưới đây. Các độ lệch chuẩn tương đối (RSD) của năm loại đường trong mẫu đậu nành đều trong phạm vi 1%.Khám phá mẫu là đáng tin cậy, và phương pháp cho thấy độ chính xác tốt.

Bảng 3 Kết quả chính xác của mẫu đậu nành

Hình 3 Chromatogram chồng chéo của bốn loại đường chính xác trong đậu nành

3.4 Kết quả thử nghiệm mẫu

3.4.1 Khám phá độ ẩm

Lấy các mẫu đậu nành và mè để thử nghiệm và xác định hàm lượng độ ẩm trong các mẫu theo GB/T 14489.1Kết quả được hiển thị trong bảng dưới đây.

Bảng 4 Kết quả độ ẩm mẫu

3.4.2 Kiểm tra mẫu

Lấy các mẫu đậu nành và dừa để thử nghiệm, chiết xuất các dung dịch mẫu theo phần 2.2.1, và thực hiện phân tích tiêm dưới các điều kiện theo thiết bị được chỉ định trong phần 2.3.1Kết quả xét nghiệm mẫu được hiển thị trong bảng dưới đây.

Bảng 5 Kết quả thử nghiệm mẫu

Hình 4 Chromatogram thử nghiệm mẫu đậu nành pha loãng 200 lần

Hình 5 Chromatogram thử nghiệm mẫu mè khô pha loãng 100 lần

4Kết luận

Phương pháp này sử dụng hệ thống sắc tố ion Wayeal IC6300 được trang bị một máy dò amperometric để thiết lập một phương pháp sắc tố ion để xác định fructose, glucose,sucrose, stachyose và raffinose trong hạt dầu. Các mẫu đã được xử lý thông qua xử lý trước, tách qua một cột sắc tố ion và định lượng bằng phương pháp tiêu chuẩn bên ngoài,cho phép phân tích chất lượng và định lượng fructose, glucose, sucrose, stachyose và raffinose trong hạt dầu.độ nhạy đáp ứng các yêu cầu tiêu chuẩn quốc gia, và các hệ số tương quan tuyến tính đều vượt quá 0.999Điều này chứng minh rằng phương pháp này, kết hợp với hệ thống nhiễm sắc thể ion của Wanyeal, đáp ứng các yêu cầu phát hiện định lượng và định lượng thường xuyên cho các mẫu mục tiêu.