2024-10-22
Xác định 6-methylcoumarin trong mỹ phẩm bằng Chromatography lỏng
1.1 Cấu hình thiết bị
Bảng 1 Danh sách cấu hình của Chromatography lỏng
| Không, không. | Mô-đun | Qty |
| 1 | PB3210 Bơm nhị phân | 1 |
| 2 | CT3400 Cửa nướng cột | 1 |
| 3 | AS3210 Máy lấy mẫu tự động | 1 |
| 4 | Máy phát hiện tia UV3210 | 1 |
| 5 | NovaChrom SC18 4,6 * 250mm, 5μm | 1 |
| 6 | SmartLab Workstation | 1 |
1.2 Phương pháp thí nghiệm
1.2.1 Các chất phản ứng
Bảng 2 Danh sách các chất phản ứng
| Không, không. | Các chất phản ứng | Độ tinh khiết |
| 1 | Methanol | Chromatographic Grade |
| 2 | 6-methylcoumarin | 99% |
| 3 | Ammonium dihydrogen phosphate | AR |
| 4 | axit phosphoric | GR |
1.2.1.1 6-Methylcoumarin dung dịch chuẩn (1000mg/L): lấy một lượng thích hợp của 6-Methylcoumarin chuẩn,hòa tan và cố định khối lượng với methanol và chuẩn bị thành dung dịch gốc tiêu chuẩn ở nồng độ 1000mg/L.
1.2.1.2 6-Methylcoumarin dung dịch làm việc tiêu chuẩn:Pipette số lượng thích hợp của dung dịch gốc chuẩn 6-methylcoumarin và pha loãng với methanol để chuẩn bị một loạt các đường cong làm việc với nồng độ 0.1mg/L, 0.5mg/L, 1.0mg/L, 3.0mg/L, 5.0mg/L và 10.0mg/L tương ứng.
1.2.1.3 dung dịch đệm natri dihydrogen phosphate: lấy 3,12g natri dihydrogen phosphate, thêm nước để hòa tan và pha loãng đến 1000mL và điều chỉnh pH axit phosphoric thành 3.5.
1.2.2 Điều kiện Chromatography
Bảng 3 Điều kiện Chromatography
| Cột sắc tố | NovaChrom SC18 4,6 * 250mm 5μm | ||
| Giai đoạn di động | A: Methanol,B: dung dịch đệm natri dihydrogen phosphate | ||
| Tỷ lệ dòng chảy | 1 ml/phút | ||
| Nhiệt độ cột | 35°C | Độ dài sóng | 275nm |
| Khối lượng tiêm | 10μL | ||
Bảng 4 Chương trình trục xuất gradient
| Thời gian ((min) | Giai đoạn di động A | Giai đoạn di động B |
| 0 | 55 | 45 |
| 11 | 55 | 45 |
| 12 | 90 | 10 |
| 40 | 90 | 10 |
| 41 | 55 | 45 |
| 50 | 55 | 45 |
1.2.3 Xử lý trước mẫu
Lấy 1g (chính xác đến 0,001g) mẫu trong một bình 10mL, thêm 5mL methanol, xoáy và lắc để trộn hoàn toàn mẫu với dung dịch chiết xuất, chiết xuất siêu âm trong 20 phút,làm mát đến nhiệt độ phòng, sau đó cố định khối lượng thành 10mL với methanol, trộn và sau đó chuyển sang ống ly tâm, ly tâm ở 5000r/min trong 5min,và các siêu chất lọc qua 0.45μm màng hữu cơ, và sau đó được thử nghiệm.
2Kết quả thí nghiệm.
2.1 Hệ thống phù hợp
Hình 1 Chromatogram tiêu chuẩn 10mg/L
Bảng 5 Dữ liệu thử nghiệm tiêu chuẩn 10 mg/l
| Các hợp chất | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh | Số tấm theo lý thuyết |
| 6-methylcoumarin | 11.168 | 574.285 | 15854 |
Lưu ý:Cromatogram và dữ liệu cho thấy 6-methylcoumarin có hình dạng đỉnh tốt, và không có đỉnh nào khác xung quanh đỉnh mục tiêu, và số mảng lý thuyết cao,đáp ứng các yêu cầu thử nghiệm.
2.2 Đường cong tiêu chuẩn
Hình 2 Kết quả thử nghiệm đường cong tiêu chuẩn
Lưu ý: Chromatogram cho thấy giá trị R của hệ số tương quan của đường cong 6-methylcoumarin là trên 0.9999, đáp ứng các yêu cầu thử nghiệm.
2.3 Khả năng lặp lại
Hình 3 Chromatogram lặp lại 3mg/L Tiêu chuẩn 6 tiêm
Bảng 6 Dữ liệu lặp lại của 3mg/ L Tiêu chuẩn 6 tiêm Bảng 6 Dữ liệu lặp lại của 3mg/ L Tiêu chuẩn 6 tiêms
|
6-methylcoumarin |
Không, không. | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh |
| 1 | 11.159 | 177.710 | |
| 2 | 11.161 | 176.711 | |
| 3 | 11.142 | 177.128 | |
| 4 | 11.152 | 176.985 | |
| 5 | 11.150 | 177.469 | |
| 6 | 11.149 | 177.629 | |
| RSD ((%) | 0.061 | 0.222 |
Lưu ý: Theo dữ liệu trong bảng trên, RSD của sự lặp lại thời gian giữ lại của 6-methylcoumarin là 0,061%, và RSD của sự lặp lại vùng đỉnh là 0,222%.Khả năng lặp lại là tốt và đáp ứng các yêu cầu thử nghiệm.
2.4 Giới hạn phát hiện
Hình 4 Chromatogram thử nghiệm với tiêu chuẩn 0,02 mg/l
Bảng 7 Dữ liệu thử nghiệm tiêu chuẩn 0,02 mg/l
| Các hợp chất | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh | SNR |
| 6-methylcoumarin | 11.153 | 1.208 | 19.296 |
Lưu ý: Theo dữ liệu ở trên, tỷ lệ tín hiệu-gọi tiếng ồn 3 lần được tính là giới hạn phát hiện, và nó được tìm thấy rằng giới hạn phát hiện của 6-methylcoumarin là 0,004mg/L.Nó đáp ứng các yêu cầu thử nghiệm..
2.5 Kết quả thử nghiệm mẫu mỹ phẩm
Hình 5 Chromatogram thử nghiệm mẫu mỹ phẩm
Lưu ý: 6-Methylcoumarin không được phát hiện trong mẫu mỹ phẩm.
2.6 Chú ý
Khi sử dụng máy ly tâm tốc độ cao, hãy cẩn thận rằng các ống được đặt đối xứng và tổng khối lượng của các ống ở hai bên đối diện là như nhau.
3Kết luận
Phương pháp phân tích được giới thiệu trong bài viết này, với tham chiếu đến các tiêu chuẩn kỹ thuật và an toàn cho mỹ phẩm trong việc phát hiện 6-methylcoumarin,bằng cách sử dụng Wayeal hiệu suất cao sắc thái lỏng LC3200 series với máy dò tia cực tímKết quả thí nghiệm cho thấy hình dạng đỉnh của 6-methylcoumarin là tốt trong thử nghiệm khả năng thích nghi của hệ thống, và không có đỉnh khác xung quanh đỉnh mục tiêu,và số lượng tấm theo lý thuyết là caoGiá trị hệ số tương quan đường cong R trên 0.9999RSD của sự lặp lại thời gian giữ lại của 6-methylcoumarin là 0,061%, và RSD của sự lặp lại vùng đỉnh là 0,222%, cho thấy khả năng lặp lại tốt..004mg/L. Tất cả các kết quả thử nghiệm trên đều đáp ứng các yêu cầu của thiết bị theo phương pháp tiêu chuẩn.
Gửi yêu cầu của bạn trực tiếp đến chúng tôi
