2024-09-27
Xác định Polyethylene Glycol bằng Chromatography Permeation Gel
1. giới thiệu
Mục đích: Xác định trọng lượng phân tử và sự phân bố của polyethylene glycol (PEG) bằng phương pháp nhiễm sắc thể thâm nhập gel hiệu suất cao (GPC).
Phương pháp:
Xtimate SEC-120, 5 μm, 7,8x300 mm cột nhiễm sắc thể xâm nhập gel
Máy phát hiện chỉ số khúc xạ chênh lệch (RID)
Giai đoạn di động: nước cực sạch
Tốc độ lưu lượng: 1,0 ml/min
Nhiệt độ cột: 35 °C;
Khối lượng tiêm: 10μl.
Các đường cong hiệu chuẩn được thiết lập và trọng lượng phân tử và kết quả phân bố của mỗi mẫu được tính bằng phần mềm GPC.
Kết quả: Tính tuyến tính của PEG là tốt khi trọng lượng phân tử nằm trong phạm vi 400-20000.giá trị RSD của thời gian giữ là 00,105%, và giá trị RSD của vùng đỉnh là 0,335%.
Kết luận: Chromatography thâm nhập gel hiệu suất cao (GPC) là một phương pháp đáng tin cậy để xác định trọng lượng phân tử và sự phân bố của PEG,có lợi thế chính xác và tái tạo cao khi được sử dụng để đánh giá tính chất đa phân tán của các hợp chất polymer.
Từ khóa: HPLC, GPC, RID, Polymer, Polyethylene Glycol
2Phương pháp thí nghiệm
2.1 Cấu hình thiết bị
Bảng 1 Danh sách cấu hình của Chromatograph lỏng hiệu suất cao
| Không. | Mô-đun | Qty |
| 1 | Chromatography chất lỏng hiệu suất cao LC3200 Series | 1 |
| 2 | PB3200 Bơm nhị phân | 1 |
| 3 | RID3300 | 1 |
| 4 | CT3200 Cửa nướng cột | 1 |
| 5 | AS3200 Autosampler | 1 |
2.2 Điều kiện thử nghiệm
Cột Chromatography: Xtimate SEC-120,5μm,7.8x300mm
Nhiệt độ cột: 35°C
Máy phát hiện: RID
Tốc độ lưu lượng: 1,0mL/min
Giai đoạn di động: Nước
Khối lượng tiêm: 10μL
2.3 Thiết bị/Các chất phản ứng và vật liệu tiêu thụ
Các chất phản ứng:
Nước siêu tinh khiết
Tiêu chuẩn: PEG400; PEG2000; PEG6000; PEG10000; PEG20000
Thiết bị phụ trợ
Cân cân phân tích
Đơn vị chiết xuất dung môi
Máy làm sạch siêu âm
Vật liệu thử nghiệm
Lớp màng lọc: màng lọc nước 0,45μm
2.4 Chuẩn bị tiêu chuẩn PEG
Pipette 0,20g mỗi tiêu chuẩn PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000 và PEG20000, thêm 10mL nước để hòa tan, trộn tốt và chuẩn bị nồng độ 20mg/mL các mẫu để thử nghiệm.
3Kết quả và thảo luận
3.1 Các tiêu chuẩn trọng lượng phân tử khác nhau
Hình 1 Chromatogram của PEG400
Bảng 1 Chromatographic Parameters of PEG400
| Không. | Các hợp chất | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh | Số đĩa theriacal | Nguyên nhân kéo dài |
| 1 | PEG400 | 10.315 | 501.732 | 2346 | 1.185 |
Bảng 2 Chromatographic Parameters của PEG2000
| Không. | Các hợp chất | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh | Số tấm theo lý thuyết | Nguyên nhân kéo dài |
| 1 | PEG2000 | 8.659 | 499.892 | 1926 | 1.230 |
Hình 3 Chromatogram của PEG6000
Bảng 3 Chromatographic Parameters of PEG6000
| Không. | Các hợp chất | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh | Số tấm theo lý thuyết | Nguyên nhân kéo dài |
| 1 | PEG6000 | 7.215 | 499.482 | 1.171 |
Hình 4 Chromatogram của PEG10000
Bảng 4 Chromatographic Parameters of PEG10000
| Không. | Các hợp chất | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh | Số tấm theo lý thuyết | Nguyên nhân kéo dài |
| 1 | PEG10000 | 6.612 | 483.657 | 2550 | 1.265 |
Hình 5 Chromatogram của PEG20000
Bảng 5 Chromatographic Parameters of PEG20000
| Không. | Các hợp chất | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh | Số tấm theo lý thuyết | Nguyên nhân kéo dài |
| 1 | PEG20000 | 6.081 | 497.803 | 1103 | 1.799 |
Hình 6 Chromatogram chồng chéo với trọng lượng phân tử khác nhau
Lưu ý: Dữ liệu trên cho thấy thời gian giữ PEG20000 là 6,081 phút, và PEG400 là 10,315 phút, các phân tử lớn được xua ra trước và các phân tử nhỏ được xua ra sau đó.
3.2 Khả năng lặp lại
Hình 7 Chromatogram chồng chéo tính lặp lại của PEG6000 (n=6)
Bảng 7 Các thông số nhiễm sắc thể lặp lại của PEG6000 (n=6)
| Không. | Các mẫu | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh |
| 1 | 6000 | 7.233 | 498.821 |
| 2 | 6000 | 7.234 | 503.367 |
| 3 | 6000 | 7.225 | 499.891 |
| 4 | 6000 | 7.221 | 499.560 |
| 5 | 6000 | 7.219 | 501.374 |
| 6 | 6000 | 7.215 | 499.482 |
| Trung bình | - | 7.225 | 500.416 |
| RSD ((%) | - | 0.105 | 0.335 |
Lưu ý: Khả năng lặp lại là tốt. RSD thời gian giữ lại là 0, 105% và RSD vùng đỉnh là 0, 335% cho 6 tiêm PEG6000.
3.3 Đường cong tiêu chuẩn
Hình 8 Đường cong tiêu chuẩn Chromatograms của trọng lượng phân tử khác nhau
Bảng 8 Đường cong chuẩn Các thông số nhiễm sắc thể của các khối lượng phân tử khác nhau
Lưu ý: Các kết quả phân bố và trọng lượng phân tử của mỗi mẫu được tính bằng phần mềm GPC.000, và hệ số tương quan tuyến tính là 0.999.
4Kết luận
Xét nghiệm polyethylene glycol (PEG) này được thực hiện bằng chromatography gel bằng cách sử dụng một chromatograph lỏng hiệu suất cao LC3200 series với máy dò chỉ số khúc xạ khác biệt.thời gian giữ PEG20000 là 6.081 phút, và PEG400 là 10.315 phút, các phân tử lớn được xua ra trước và các phân tử nhỏ hơn được xua ra sau đó.105% và RSD của vùng đỉnh là 0.335% cho 6 tiêm PEG6000. tính tuyến tính của trọng lượng phân tử PEG là tốt trong phạm vi 400 đến 20,000, và hệ số tương quan tuyến tính là 0.9999Chromatography thâm nhập gel hiệu suất cao (GPC) là một phương pháp đáng tin cậy để xác định trọng lượng phân tử và sự phân bố của PEG,có lợi thế của kết quả chính xác và tái tạo khi được sử dụng để đánh giá tính chất đa phân tán của các hợp chất polymer.
Lưu ý: Mẫu sẽ được để ở nhiệt độ phòng trong hơn 12h và nên được trộn nhẹ nhàng, không sử dụng siêu âm hoặc lắc mạnh mẽ để tăng tốc độ hòa tan.
Gửi yêu cầu của bạn trực tiếp đến chúng tôi
