2024-09-05
Xác định hàm lượng Acyclovir bằng Chromatography lỏng hiệu suất cao
Phương pháp phân tích được giới thiệu trong bài viết này, với tham chiếu đến ấn bản năm 2020 của Sách dược phẩm của Cộng hòa Nhân dân Trung Quốc trong phương pháp thử nghiệm Acyclovir,bằng cách sử dụng Wayeal hiệu suất cao nhiễm sắc thể lỏng LC3200 series với một máy dò DAD.
1Thiết lập thiết bị và phương pháp thử nghiệm
1.1 Cấu hình thiết bị
| Không. | Tên | Qty |
| 1 | P3210Q Máy bơm tứ giác | 1 |
| 2 | CT3400 Cửa nướng cột | 1 |
| 3 | AS3210 Máy lấy mẫu tự động | 1 |
| 4 | DAD3260 DAD Detector | 1 |
| 5 | Nova Atom PC18 4,6x250mm 5μm | 1 |
| 6 | Trạm làm việc Chromatography | 1 |
1.2 Phương pháp thí nghiệm
1.2.1 Chất phản ứng Chuẩn bị
Bảng 2 Danh sách các chất phản ứng
| Không. | Các chất phản ứng | Độ tinh khiết |
|
1 2 3 4 5 |
Methanol axit phosphoric Natri hydroxit Acyclovir Guanine |
Chromatographic Purity ((LC) GR MOS 98% 99% |
1.2.1.1 Giải pháp thử nghiệm: Lấy 40mg mẫu vào bình đo 200mL, thêm 2mL natri hydroxit 0,4% để hòa tan, sau đó thêm 25mL 0.dung dịch axit phosphoric 1% (V/V) và pha loãng nó với nước đến tỷ lệ, lắc tốt.
1.2.1.2 Giải pháp tham chiếu: Lấy 1 ml dung dịch thử nghiệm vào bình đo 100 mL, thêm 5 mL dung dịch axit phosphoric 0,1%, pha loãng với nước để cân và lắc kỹ.
1.2.1.3 Giải pháp lưu trữ kiểm soát guanine: Lấy 10mg guanine tham khảo vào một bình đo 50mL, thêm 5mL dung dịch 0,4% natri hydroxit để hòa tan nó, sau đó thêm 5mL 0.1% dung dịch axit phosphoric, pha loãng với nước đến cân bằng, lắc tốt.
1.2.1.4 Giải pháp tham khảo guanine: Lấy 1mL giải pháp lưu trữ tham khảo guanine vào một bình 100mL, pha loãng với nước và lắc kỹ.
1.2.1.5 Giải pháp phù hợp với hệ thống: Lấy một lượng thích hợp của mỗi giải pháp tham khảo và giải pháp tham khảo guanine, trộn với khối lượng bằng nhau và lắc tốt.
1.2.2 Tình trạng Chromatography
Bảng 3 Điều kiện Chromatography
| Cột sắc tố | Nova Atom PC18 Chromatography Column, 4,6*250mm, 5μm | ||
| Giai đoạn di động | Giai đoạn di động A: Nước | Giai đoạn di động B: Methanol | |
| Tỷ lệ dòng chảy | 1 ml/phút | ||
| Nhiệt độ cột | 35°C | Độ dài sóng | 254nm |
| Khối lượng tiêm | 20μL | ||
Bảng 4 Tỷ lệ pha di động
| Thời gian (phút) | Giai đoạn di động A | Giai đoạn di động B |
| 0 | 94 | 6 |
| 15 | 94 | 6 |
| 40 | 65 | 35 |
| 41 | 94 | 6 |
| 51 | 94 | 6 |
2Kết quả thí nghiệm.
2.1 Giải pháp phù hợp với hệ thống
Hình 1 Chromatogram thử nghiệm dung dịch phù hợp với hệ thống
Bảng 5 Giải pháp phù hợp với hệ thống dữ liệu thử nghiệm
| Không. | Chất hợp chất | Thời gian lưu trữ | Khu vực đỉnh | Số bảng hiệu lý thuyết | Phân ly |
| 1 | Guanine | 5.698 | 138.675 | 17173 | 12.334 |
| 2 | Acyclovir | 8.425 | 139.902 | 15786 | N.a. |
Lưu ý: Từ biểu đồ trên và dữ liệu trong bảng, có thể thấy rằng Acyclovir và Guanine có hình dạng đỉnh tốt hơn và số đĩa lý thuyết cao.0, đáp ứng các yêu cầu trong sách dược phẩm.
2.2 Khả năng lặp lại
Hình 2 Chromatogram lặp lại của 6 tiêm phù hợp với hệ thống
Bảng 6 Dữ liệu lặp lại của 6 lần tiêm dung dịch phù hợp với hệ thống Thời gian giữ lại
| Mẫu | Không. | Guanine | Acyclovir |
|
Thời gian lưu trữ |
1 | 5.698 | 8.408 |
| 2 | 5.701 | 8.415 | |
| 3 | 5.705 | 8.411 | |
| 4 | 5.701 | 8.405 | |
| 5 | 5.705 | 8.401 | |
| 6 | 5.705 | 8.398 | |
| RSD (%) | 0.048 | 0.074 |
Bảng 7 Dữ liệu lặp lại của 6 tiêm dung dịch phù hợp với hệ thống Vùng đỉnh
| Mẫu | Không. | Guanine | Acyclovir |
|
Khu vực đỉnh |
1 | 136.997 | 138.836 |
| 2 | 138.496 | 139.117 | |
| 3 | 137.783 | 139.505 | |
| 4 | 136.663 | 138.204 | |
| 5 | 137.755 | 137.968 | |
| 6 | 137.789 | 139.374 | |
| RSD (%) | 0.475 | 0.452 |
Lưu ý: Theo dữ liệu trong bảng trên, RSD của thời gian giữ guanine và acyclovir trong dung dịch phù hợp với hệ thống là 0,048% và 0,074%, và RSD của vùng đỉnh là 0, 475% và 0.452%Các kết quả tái tạo là tốt và đáp ứng các yêu cầu thử nghiệm.
Gửi yêu cầu của bạn trực tiếp đến chúng tôi
